山东白癜风医院 http://m.39.net/baidianfeng/a_4318885.html年,mNGS走入大众视野,新英格兰医学杂志(NEJM)刊登了一则病例:14岁联合免疫缺陷综合征男孩,年波多黎各旅行回国后因脑膜炎住院,发展为脑积水和癫痫状态。6周内进行38项感染病原检测,先后联用5种抗菌药物,未查出病因,尝试按照自免脑引起的昏迷状态治疗。48小时脑脊液宏基因组测序,检出圣地罗西钩端螺旋体序列条,改用青霉素治疗,32天后男孩痊愈出院。NEJM主编评论该报告的标题为“NGS,一个病例如何改变世界”,可见NGS的重要意义。随后,mNGS迅速被临床认可,年美国FDANGS感染性疾病诊断策略提出,mNGS可以用于微生物鉴定,检测是否耐药,是否是毒力标志物。目前,病原体高通量测序的临床适应症包括:疑难:不明原因感染诊断,病因排查;危重:重症肺炎、脑膜炎、脓毒症等;特殊:免疫低下人群,如移植患者、肿瘤患者等。mNGS的技术正随着社会的发展,在不断进步、完善。正确认识mNGS技术的局限和挑战与传统病原微生物检测相比,mNGS敏感性高,信息量大,但也存在一定的局限性。mNGS结果解读应注意什么?检出的病原体:只能代表标本中存在这些检出微生物,但不能确定是定植菌、背景菌还是致病菌。胞内菌/真菌检出率低:胞内感染菌因释放到体液中含量较少而导致检测敏感性偏低。另外,具有较厚细胞壁的病原体,其核酸提取效率较低,导致检出率和敏感性较低。RNA病原体的检测:RNA转录本身有更高的丰度和复杂度,又容易降解,对运输和保存的要求较高,因此RNA病毒的临床检测还存在一定的困难。可靠程度:不同的公司,对于可靠程度的数据采用不同的报告方法,如深度、覆盖度、丰度、估测浓度、置信度,各有千秋,需要统一。最重要的参数需谨记:病原体,序列数。reads数的高与低意味着什么?reads指的是匹配到该病原体的序列数目,reads高不一定意味着致病,reads数低不一定意味着不致病,数的多少与标本中病原体含量多少、标本中核酸提取量及标本中人源序列比例有关。不同的病原体,具有不同的reads数特点,单个病原体逐个分析至关重要。结合reads数目、病原体排位,临床才能更好的进行分析。合理报告,注意区分背景菌老年男性,因“流感”1周入住呼吸ICU,PCR确诊重症甲流肺炎,治疗好转,第5天再次发热,病情加重,考虑继发曲霉感染,经验性抗曲霉治疗。诊断是否成立?经验性治疗合理吗?检查GM试验,血清GM3.81,BALFGM4.34,高度拟诊,但所有标本培养无真菌生长。此时BALFmNGS结果汇报,检测到烟曲霉,诊断成立,继续治疗痊愈。因此,mNGS报告时要注意以下三个要点:是否是致病病原体或条件致病病原体;人体正常存在微生物,在免疫缺陷等特殊患者中值得
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